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本文可以教你大鼠ELISA试剂盒的洗版方法

更新时间:2022-06-09 点击量:651
  大鼠ELISA试剂盒标本要求:
  1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
  2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
  大鼠ELISA试剂盒洗板方法:
  手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
  自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
  大鼠ELISA试剂盒操作的具体步骤:
  1、标准品的稀释。
  2、加样:分别设空白孔、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  4、配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
  5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复。
  6、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  7、再次温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  8、再次洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去。
  9、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  10、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  11、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。