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本文可以教你大鼠ELISA试剂盒的洗版方法

更新时间：2022-06-09　点击量：607

　　大鼠ELISA试剂盒标本要求：

　　1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

　　2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

　　大鼠ELISA试剂盒洗板方法：

　　手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。

　　自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

　　大鼠ELISA试剂盒操作的具体步骤：

　　1、标准品的稀释。

　　2、加样：分别设空白孔、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

　　3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

　　4、配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

　　5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复。

　　6、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

　　7、再次温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

　　8、再次洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去。

　　9、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

　　10、终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

　　11、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。