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细胞因子的溶解和装配贮存方法

更新时间:2022-06-24 点击量:526
  细胞因子一般通过结合相应受体调节细胞生长、分化和效应,调控免疫应答。是由免疫细胞和某些非免疫细胞经刺激而合成、分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子蛋白质。以非特异性方式发挥生物学作用,主要参与免疫反应和炎症反应,影响反应的强度和持续时间的长短,涉及感染免疫,肿瘤免疫,自身免疫,移植免疫等。
  细胞因子溶解方法:用去离子水或其它缓冲液(根据说明书要求进行选择)溶解至说明书要求的浓度(一般为0.1-1.0mg/mL,如10ug的产品,需用10uL-100uL的去离子水或缓冲液溶解)。溶解时不可振荡,避免因化学键的断裂造成蛋白失活,可加入适当的溶剂轻摇并静置一段时间,待细胞因子*溶解后使用。溶剂的选择:要求用去离子水溶解的产品,务必不可用盐溶液,避免过高的盐浓度造成蛋白不可逆的析出;要求用盐溶液溶解的产品,请依照说明书上的浓度,同样也是为了避免过高的盐浓度。
  细胞因子的分装和贮存:蛋白溶解后可根据自己的实验需要进一步稀释成工作液,稀释可用RPMI1640、DMEM或PBS等溶液,其中最好含有5-10%的FCS或0.5%的BSA来稳定蛋白。工作液在4℃可保存1周,如需长期保存,则需分装冻存于-20℃。分装时每管中工作液的体积最好是一次实验的用量,以实现每次实验用完一只工作液,避免反复冻融引起蛋白活性的降低。