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如何避免胎牛血清中产生沉淀?

更新时间:2022-03-27 点击量:2724
  胎牛血清作用主要体现在哪些方面:
  1、提供维持细胞指数生长的激素、基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
  2、起酸碱度缓冲液作用。
  3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
  4、提供结合蛋白,能识别并结合维生素、脂类、金属和其他激素等,能调节它们所结合物质的活力。
  5、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
  6、提供蛋白酶抑制剂,细胞传代时能使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
  如何避免胎牛血清中产生沉淀?
  解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
  胎牛血清作冻融方法和注意事项:
  将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱12-24小时左右使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
  切勿将刚刚从-20℃冰箱里拿出来的血清直接放在水浴中,无论室温的水或者37℃的水,因为在水浴中血清迅速熔化,很大的温差(-20℃到37℃,温差为57℃)极其容易造成血清产生沉淀。
  血清应该在-10℃以下保存。若一次无法用完一瓶,应该无菌分装,再冷冻保存。