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简要描述:小鼠蛋白激酶B(PKB)酶联免疫检测试剂盒适用于体外定量检测小鼠血清、血浆或其它相关生物液体中天然和重组蛋白激酶B(PKB)的浓度。本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
产品型号: 96t/48t
所属分类:Mouse/小鼠ELISA试剂盒
更新时间:2024-12-21
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶联免疫检测试剂盒(灵敏性高 、特异性强 、重复性好)采用酶联检测抗体包被法,质量好价格高,检测步骤多,出结果时间较长;*快递。
规格96T/48T
保存条件:2-8℃低温保存
说明书:说明书随货发送,您也可以直接我司在线销售人员索取。
特点:灵敏性高、特异性强、重复性好
服务:所有的elisa试剂盒均免费代测,全程Elisa实验技术指导,免费代做实验。
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶联免疫检测试剂盒实验方案:
一,ATP诱导激活的表达
1)收集人的单核细胞THP-1,加入基础培养基RPMI1640,37℃,5%CO2培养箱中过夜培养细胞使其浓度达到106/ml,再加入1ml RPMI1640培养基,过夜培养。
2)过夜培养12h的细胞,加入终浓度为1ug/ml的LPS,刺激培养3h后,小鼠蛋白激酶B(PKB)酶联免疫检测试剂盒再次加入终浓度为5mM的ATP溶液(100mM,pH =7)激活培养2h。
二,THP-1细胞上清及内含物的收集
培养好的细胞,收集细胞上清及细胞。对于上清液,1000g离心20分钟,将上清用于后续的含量检测。细胞内含物,先用预冷的PBS洗3次,用物理(超声破粹或者反复冻融)或者化学方法(细胞裂解液)裂解细胞,1000g离心20分钟,取上清进行检测。
三,定量检测
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶联免疫检测试剂盒分别取上清溶液,使用酶联免疫检测试剂盒定量检测样本中的含量。
实验结果:
ATP及LPS处理THP-1细胞后,细胞上清和细胞裂解液中的的表达量如图2所示:
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