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白介素2Elisa试剂盒标本处理办法

发布时间:2022-03-15 点击量:1506
  白介素2Elisa试剂盒实验原理:
  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中羊白细胞介素2(IL-2)水平。用纯化的羊白细胞介素2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2(IL-2),再与HRP标记的白细胞介素2(IL-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素2(IL-2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中羊白细胞介素2(IL-2)浓度。
  白介素2Elisa试剂盒注意事项:
  1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
  2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
  3.一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。
  5.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。
  6.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
  7.底物请避光保存。
  8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
  白介素2Elisa试剂盒标本处理办法:
  实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mo/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。
  若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。
  若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
  使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引|入导致ELISA实验结果偏差。