当前位置:网站首页技术文章 > 抗体课堂:正确选择同型对照,阳性对照

抗体课堂:正确选择同型对照,阳性对照

更新时间:2017-11-01 点击量:2188

抗体课堂:正确选择同型对照,阳性对照

同型对照的主要目的是确定一抗的结合是特异性的,而不是非特异性的Fc受体或与其他蛋白的相互作用。同型对照要与一抗的来源、Ig分型和标记*一致。例如:一抗是FITC标记,其抗体分型是小鼠的IgG1,则同型对照要选择是FITC标记的小鼠的IgG1。这里如同使用流式抗体一样,同样的不可离开说明书!

多抗的同型对照:

  绝大部分的同型对照产品都是单克隆抗体,因此不适用于作为多克隆抗体的对照(因为多抗含有多种IgG的亚型)。

阳性对照的使用是一个实验中确定抗体及检测系统是否正常工作的依据,也是确定待测标本中是否存在待测蛋白的一个依据!尤其是检测的标本是不确定是否有待测蛋白表达时。因此当实验没有阳性结果出现时,的选择是实验合适的阳性对照。

说明书上都有推荐的阳性对照。但是如果说明书上没有推荐时,请参考以下条款:

看看说明书中是否有Abreviews。任何被其他客户成功检测的组织、细胞或者裂解物均可以作为合适的阳性对照!

根据说明书上的Swiss-Prot或Omnigene数据库来查找。这些数据库经常会列出该蛋白表达的组织,这也可以作为合适的阳性对照!

查查该蛋白的GeneCards吧,这里通常会有蛋白在不同组织的表达水平。

对于不同的问题,不同的测试,相关性的不同的性能,拿流式抗体来说,在使用的过程中要特别谨说明书使用!