以下是AusGene胎牛血清是一种广泛应用于细胞培养的天然培养基补充剂,其质量直接影响细胞生长状态和实验结果。以下是影响AusGene胎牛血清使用效果的主要因素:
一、血清本身的特性
1.批次差异:
不同批次的胎牛血清可能因来源胎牛的健康状况、采集工艺、储存条件等存在差异,导致营养成分、生长因子、激素水平及内毒素含量不同。
解决方案:同一实验或长期培养时,尽量选择同一批次血清,并提前进行细胞适应性测试。
2.质量控制指标:
内毒素:高水平内毒素会激活细胞炎症反应,影响细胞活性。
血红蛋白:高浓度游离血红蛋白可能对细胞产生毒性。
微生物污染:需确保无菌,且无支原体、病毒等污染。
生长因子与营养物质:如胰岛素、转铁蛋白、氨基酸等浓度直接影响细胞增殖能力。
1.储存条件:
未开封的血清应保存于-5℃~-20℃(避免反复冻融),开封后需尽快分装并冷冻,避免多次解冻导致蛋白降解或污染。
错误操作:长时间室温放置、反复冻融(每次冻融会造成血清中蛋白质变性或溶菌*失活)。
2.分装与解冻:
建议将大瓶血清分装成小份,减少重复冻融次数。
解冻时需在2~8℃缓慢融化(可放置于冰箱冷藏层或低温水浴),避免高温加速蛋白失活。
三、AusGene胎牛血清细胞培养体系的影响
1.细胞类型:
不同细胞对血清的依赖性不同。例如,原代细胞、干细胞通常需要更高浓度的血清,而传代细胞可能仅需5%~10%。
AusGene血清需根据细胞特性调整浓度,浓度过高可能抑制某些细胞的生长。
2.培养基配方:
血清需与基础培养基和其他添加剂兼容。
注意:避免血清与某些抗生素长时间混合,可能降低血清活性。
3.培养环境:
pH值:血清的加入会略微改变培养基的pH值,需通过酸碱调节维持稳定。
渗透压:高浓度血清可能影响培养基的渗透压,需平衡血清比例与细胞耐受性。
