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ATCC原代细胞使用的注意事项,大家可以来本文看看

更新时间:2022-09-21 点击量:601
  ATCC原代细胞使用的注意事项如下:
  1、请先检查是否有漏液或者污染情况,若发现漏液或者污染,请拍照发给我们,我们核实后会进行退换。
  2、请先放置于显微镜下观察细胞生长状态,撕去封口膜并将瓶子置于37℃培养约2-3个小时。
  3、弃去瓶中的培养基,添加附带的*培养基。
  4、如果细胞长满到90%以上,就要及时进行细胞传代,传代培养用附带的*培养基。
  ATCC原代细胞冻存过后的复苏和培养:
  1、先准备好细胞培养皿或细胞培养瓶,及产品说明推荐的相应细胞培养基。并在37℃水浴中预先温热细胞培养基。
  2、小心取出装有细胞的冻存管,保持管盖拧紧,将冻存管盖以下的部分置于37℃水浴中并轻微的搅拌以帮助解冻。解冻过程应该尽快,大约短于两分钟或待后一块小冰晶体刚融化,就应将细胞冻存管取出水浴。
  3、在水浴中取出的细胞冻存管表面喷洒70%乙醇配制的消毒剂,用无菌纸巾或纱布拭干。之后的操作步骤都应该遵循在无菌条件下生物安全柜中严格操作。
  4、小心拧开冻存管的顶部,将管内容物用1ml移液枪转移到含9毫升培养基的无菌离心管中。离心5到7分钟(125xg),小心吸去上清液以去除抗冻剂(二甲基亚砜),避免丢失细胞沉淀。将细胞沉淀重悬于配好的*培养基中。将细胞悬液转移到培养容器,轻轻摇晃使细胞均匀的分布。生长较慢的细胞株可重悬于5-8ml培养基并转移到T25培养瓶。生长较快的细胞株可重悬于12-20ml培养基并转移到T75培养瓶。
  5、将细胞培养容器置于细胞培养箱,在温度37℃,二氧化碳浓度5%的培养条件下进行孵育。细胞培养24小时后应在显微镜下观察细胞形态和生长状况。